GM501 Gradient 100 %

GM501 Gradient 100 % est une solution isotonique pour la préparation de sperme avec une densité d’environ 1,12 g/ml. GM501 Gradient 100 % peut être utilisé en combinaison avec l’IIU, la FIV et l’ICSI (injection intra-cytoplasmique de spermatozoïde).

Description Nr. de Ref Contenance
GM501 Gradient 100 % 4 GM 501G-100-50 50 ml
GM501 Gradient 100 % 4 GM 501G-100-100 100 ml
GM501 Gradient 100 % 4 GM 501G-100-250 250 ml
GM501 Gradient 100 % 4 GM 501G-100-500 500 ml

Données et informations sur le produit

Composition:

  • GM501 Gradient 100 % se compose de particules de silice colloïdale recouvertes de silane resuspendues dans un milieu tamponné à l’HEPES.

Spécifications du produit et contrôle qualité:

  • Toutes les matières premières sont de la plus grande pureté disponible (en pharmacopée européenne et/ou aux normes USP), le cas échéant.
  • Un certificat d’analyse est disponible pour chaque lot sur demande sur notre site Internet avec le numéro de lot correspondant.
  • La fiche de données de sécurité de GM501 Gradient 100% est disponible sur demande, et peut être téléchargée sur notre site Internet.
  • GM501 Gradient 100% est fabriquée et testée selon les spécifications suivantes:

 

pH 7.20-7.90 (critère d’acceptation: 7.20-7.60)
Osmolalité (mOsm/kg) 300-330
Densité (g/ml) 1.1150-1.1250
Viscosité (cP) < 1.75
Stérilité stérile – niveau d’assurance de stérilité (SAL) 10-3
Endotoxines (EU/ml) < 0.5
Test de survie des spermatozoïdes (%) ≥ 80
Survie après 4 heures d’exposition de spermatozoïdes d’une densité sélectionnée au milieu du test
test sur embryons de souris (MEA) non testé MEA

Instructions pour la préparation de gradients:

  • Mélanger les bouteilles de gradient de densité en inversant les bouteilles 5 fois avant utilisation.
  • Nous conseillons de produire un système de gradient à 2 phases (45 % et 90 %). Vous pouvez préférer un ratio de mélange différent (par ex. 40 % et 80 %) ou un gradient à plusieurs couches (45 %-70 %-90 %).
  • Mélanger 9 parts de GM501 Gradient 100 % avec 1 part de milieu de lavage pour produire le gradient à 90 %.
  • Mélanger 4.5 parts de GM501 Gradient 100 % avec 5.5 parts de milieu de lavage pour produire le gradient à 45 %.

Remarque : Les gradients doivent être préparés et reconditionnés dans des conditions stériles (par ex dans une hotte à flux laminaire ISO 5). Pour des résultats optimaux, préparer le milieu de gradient au maximum 24 heures avant utilisation. Bien mélanger après la dilution du GM501 Gradient 100 %.

Calcul des accélérations:
L’accélération de votre centrifugeuse peut être calculée en utilisant cette formule :
g = 1,118 x r x rpm2 ou rpm = racine carrée {g/ (1,118 x r)}

r = rayon de la centrifugeuse en mm
rpm = rotations par minute/1000

Exemple 1
r = 150 mm
rpm = 1200 rotations par minute
g = 1,118 x 150 x 1,44 = 242 g

Exemple 2
r = 150 mm
g = 300 g
rpm = RC {300/ (1,118 x 150)} = 1,33
rpm = 1330 rotations par minute

Instructions d’utilisation avec des échantillons de sperme frais:

  1. Avant utilisation, réchauffer tous les composants du système et les échantillons à 37¨°C ou à température ambiante.
  2. Mélanger les bouteilles de gradient de densité en inversant les bouteilles 5 fois avant utilisation.
  3. Pipetter 2,5 ml du gradient de densité inférieure (45 %) dans un tube de centrifugation jetable.
  4. À l’aide d’une seringue de 3 ml munie d’une aiguille de 21 G, déposer une couche de 2,5 ml du gradient de densité élevée (90 %) sous le gradient de densité inférieure (45 %) sans faire de bulles d’air. Faire attention à ce que les deux couches soient clairement séparées. Pour cela, placer le bout de l’aiguille au fond du tube de centrifugation et éjecter doucement le gradient de densité élevée. Ce gradient à deux couches est stable pendant deux heures environ.
  5. Placer doucement 2,5 ml de sperme liquéfié sur la couche supérieure en utilisant une pipette ou une seringue de transfert.
  6. Centrifuger à 350-400 g pendant 15-18 minutes. Si aucun culot n’est visible après cette étape, centrifuger pendant 3 minutes supplémentaires.
  7. Aspirer le surnageant.
  8. À l’aide d’une seringue, resuspendre le culot dans 2-3 ml de milieu de lavage frais.
  9. Centrifuger à 300 g pendant 8-10 minutes. Si vous voulez obtenir des concentrations plus élevées de sperme, il est conseillé de centrifuger pendant les 10 minutes.
  10. Aspirer le surnageant et répéter les deux dernières étapes.
  11. Finalement, enlever le surnageant et resuspendre à nouveau le culot dans un milieu approprié pour l’utilisation dans la procédure ultérieure de procréation assistée (par ex. FIV, ICSI, IIU).

 

Instructions d’utilisation avec des échantillons de sperme congelés:

  1. Avant utilisation, réchauffer tous les composants du système et les échantillons à 37¨°C ou à température ambiante.
  2. Mélanger les bouteilles de gradient de densité en inversant les bouteilles 5 fois avant utilisation.
  3. Pipetter 1 ml du gradient de densité inférieure (45 %) dans un tube de centrifugation jetable.
  4. À l’aide d’une seringue de 3 ml munie d’une aiguille de 21 G, déposer une couche de 1 ml du gradient de densité élevée (90 %) sous le gradient de densité inférieure (45 %) sans faire de bulles d’air. Faire attention à ce que les deux couches soient clairement séparées. Pour cela, placer le bout de l’aiguille au fond du tube de centrifugation et éjecter doucement le gradient de densité élevée. Ces deux couches de gradient sont stables pendant deux heures environ.
  5. Placer doucement 0,5 ml de sperme décongelé au maximum sur la couche supérieure en utilisant une pipette ou une seringue de transfert.
  6. Centrifuger à 15-20 minutes à 350 g. Si aucun culot n’est visible après cette étape, centrifuger pendant 3 minutes supplémentaires.
  7. Aspirer le surnageant sans dépasser la marque de 0,5 ml au-dessus du culot.
  8. À l’aide d’une seringue, resuspendre le culot dans 2-3 ml de milieu de lavage frais.
  9. Centrifuger à 300 g pendant 8-10 minutes. Si vous voulez obtenir des concentrations plus élevées de sperme, il est conseillé de centrifuger pendant les 10 minutes.
  10. Aspirer le surnageant et répéter les deux dernières étapes.
  11. Finalement, enlever le reste du surnageant et resuspendre à nouveau le culot dans une quantité appropriée pour l’utilisation dans la procédure ultérieure de procréation assistée (par ex. FIV, ICSI, IIU).

Pour obtenir une meilleure séparation des spermatozoïdes, l’échantillon ne doit pas être dilué, mais la force centrifuge doit plutôt être augmentée (pas au-dessus de 500 g).

Précautions et mise en garde:

  • Tout matériel biologique humain doit être considéré comme potentiellement infectieux. Manipuler tous les échantillons comme s’ils pouvaient transmettre le VIH ou l’hépatite.
  • Toujours porter des vêtements de protection lors de la manipulation d’échantillons.
  • Toujours travailler dans des conditions d‘hygiène rigoureuses (hotte à flux laminaire ISO 5) pour éviter une contamination potentielle.
  • À n’utiliser que pour l’usage prévu.
  • L’établissement de l’utilisateur de ce dispositif est responsable de la maintenance de la traçabilité du produit et doit respecter les réglementations nationales concernant la traçabilité, s’il y a lieu.

Vérifications avant utilisation:

  • Ne pas utiliser le produit s’il est décoloré, trouble ou présente le moindre signe de contamination microbienne.
  • Ne pas utiliser le produit si l’opercule du conteneur est ouvert ou défectueux à la livraison du produit.

Instructions de conservation et stabilité:

  • La durée de conservation est de 18 mois à partir du moment de la fabrication.
  • Conserver les produits entre 2 et 8 °C.
  • Le produit peut être utilisé sans problème jusqu’à 7 jours après ouverture, lorsque des conditions stériles sont maintenues et que les produits sont conservés à 2-8 °C.
  • Ne pas congeler avant utilisation.
  • Ne pas utiliser après la date d’expiration.
  • Conserver à l‘abri de la lumière (du soleil).
  • Ouvrir et fermer les bouteilles dans des conditions d’asepsie (par ex. hotte à flux laminaire, classe ISO 5).
  • Le contenu ne peut pas être stérilisé à nouveau après ouverture.
  • Stable après transport (5 jours maximum) à température élevée (£ 37°C).
         

Téléchargements

instruction d'utilisation (2 Mo)

MSDS (556 Ko)

EC Certificate of Conformity (703 Ko)

Fertility Treatment Catalogue (22 Mo)